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Beyotime碧云天RIPA裂解液(強(qiáng))(P0013B)產(chǎn)品介紹

 更新時(shí)間:2024-03-05 點(diǎn)擊量:1064

Beyotime碧云天RIPA裂解液(強(qiáng))(P0013B)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀和ELISA等。

RIPA裂解液可以用于動(dòng)物、植物的細(xì)胞或組織樣品,也可以用于真菌或細(xì)菌樣品。RIPA裂解液的配方有很多種,根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類。

使用說明:

1. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM,或者根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入適當(dāng)?shù)纳鲜龅鞍酌噶姿崦敢种苿┗旌衔铩?/p>

2. 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸動(dòng)物細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會(huì)被裂解。植物細(xì)胞宜在冰上裂解2-10min。

對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,輕輕vortex或者彈擊管底以把細(xì)胞盡量分散開。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。輕彈管底以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管,然后再裂解。

對于細(xì)菌或酵母:對于1ml菌液或酵母液,離心去上清,如果有必要可以使用PBS洗滌一次,充分去除液體后,輕輕vortex或者彈擊管底以把細(xì)菌或酵母盡量彈散。加入100-200微升裂解液,輕輕vortex或者彈擊管底以混勻,冰上裂解2-10min。如果希望獲得更好的裂解效果,細(xì)菌和酵母可以分別使用溶菌酶和破壁酶(Lyticase)消化,然后再使用本裂解液進(jìn)行裂解。

裂解液用量說明:通常6孔板每孔細(xì)胞或者1ml的菌液或酵母液中的細(xì)菌和酵母量加入150微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。每100萬動(dòng)物細(xì)胞用100微升本產(chǎn)品裂解后獲得的上清,其蛋白濃度約為2-4mg/ml,不同細(xì)胞有所不同。

3. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。

產(chǎn)品選購:

貨號(hào)

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

P0013B

RIPA裂解液(強(qiáng))

100mL